TS2 Biot. : GG : Travail à la maison – Semaines 2&3 1 CHAPITRE VII : LE TRANSFERT DES GENES DANS LES CELLULES EUCARYOTES ET LA TRANSGENESE 1. Les vecteurs et procédés de transfection des cellules eucaryotes 1.1. Les vecteurs 1.1.1. Les vecteurs de levures...
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TS2 Biot. : GG : Travail à la maison – Semaines 2&3 1 CHAPITRE VII : LE TRANSFERT DES GENES DANS LES CELLULES EUCARYOTES ET LA TRANSGENESE 1. Les vecteurs et procédés de transfection des cellules eucaryotes 1.1. Les vecteurs 1.1.1. Les vecteurs de levures DOCUMENT 1 : « Yeasts Artificial Chromosoms » ou YACs Working with a YAC. (A) The cloning vector pYAC3. (B) To clone with pYAC3, the circular vector is digested with BamHI and SnaBI. BamHI restriction removes the stuffer fragment held between the two telomeres in the circular molecule. SnaBI cuts within the SUP4 gene and provides the site into which new DNA will be inserted. Ligation of the two vector arms with new DNA produces the structure shown at the bottom. This structure carries functional copies of the TRP1 and URA3 selectable markers. The host strain has inactivated copies of these genes, which means that it requires tryptophan and uracil as nutrients. After transformation, cells are plated onto a minimal medium, lacking trypt
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