Preparación de Curva de Calibración con Bio Rad Protein Assay
1. Rotular 6 cubetas de la siguiente forma:
Blanco, 1, 2, 4, 8 ,12
2. Encender el espectrofotometro en luz visible a un lambda de 595nm.
3. Preparar dilucion de Bio Rad Protein Dye 1:5...
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Preparación de Curva de Calibración con Bio Rad Protein Assay
1. Rotular 6 cubetas de la siguiente forma:
Blanco, 1, 2, 4, 8 ,12
2. Encender el espectrofotometro en luz visible a un lambda de 595nm.
3. Preparar dilucion de Bio Rad Protein Dye 1:5 (2:10.)
4. Servir 1 ml de esta dilucion en cada cuveta.
5. Servir los ul necesarios del BSA para tener los ug equivalentes de esta proteina
en cada cubeta.
Ej: Si su stock de BSA esta a 2ug/ul,
usted servira 0.5ul, 1ul, 2 ul, 4 ul, y 6 ul
en las cubetas rotuladas 1, 2, 4, 8, 12.
6.Dejar reposar a RT por min.
7.Leer sus muestras en el espectrofotometro segun las intrucciones del equipo.
su cubeta B es el blanco o referencia.
8. Anotar la absorbancia correspondiente a cada cubeta
9. Preparar grafica de Abs vs ug de proteinas en excel
10. Buscar la linea q mejor fit a los puntos
11. Buscar la ecuacion de la recta y=mx + b
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