基因工程的诞生
由于分子生物学和分子遗传学发展的影响,基因分子生物
学的研究也取得了前所未有的进步。为基因工程的诞生奠定了
坚实的理论基础,这些成就主要包括了 3 个方面:第一,在 40
年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是 D N A 而
不是蛋白质,从而明确了遗传的物质基础问题;第二,是在 50
年代揭示了 D N A 分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制 ,
解决了基因的自我复制和传递的问题;第三,是在 50 年代末
期和 60 年初,相继提出了中心法则和操纵子学说,并成功的...
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基因工程的诞生
由于分子生物学和分子遗传学发展的影响,基因分子生物
学的研究也取得了前所未有的进步。为基因工程的诞生奠定了
坚实的理论基础,这些成就主要包括了 3 个方面:第一,在 40
年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是 D N A 而
不是蛋白质,从而明确了遗传的物质基础问题;第二,是在 50
年代揭示了 D N A 分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制 ,
解决了基因的自我复制和传递的问题;第三,是在 50 年代末
期和 60 年初,相继提出了中心法则和操纵子学说,并成功的
破译了遗传密码,从而阐明了遗传信息的流向和表达问题。
使人们期待已久的,应用类似于工程技术的程序,主动
的改造生物的遗传特性,创造具有优良性状的生物新类型的美
好愿望,从理论上讲已有可能变为现实。
但在 60 年代的科学技术发展水平下,真正实施基因工程,还
有一些问题:
要详细了解 DN A 编码蛋白质的情况,以及 DN A 与基因
的关系等,就必须首先弄清 D N A 核苷酸序列的整体结构,怎
样才能分离出单基因,以便能够在体外对它的结构与功能等一
系列的有关问题作深入的研究,对于基因操作来说是十分重要
的环节。在 70 年代两项关键技术:DN A 分子的切割与连接技术,
D N A 的核苷酸序列分析技术从根本上解决了 DN A 的结构分析
问题。
应用限制性核酸内切酶和 D N A 连接酶对 D N A 分子进行
体外的切割与连接,是 60 年代末和 70 年代初发展起来的一项
重要的基因操作技术。有人甚至说它是重组 D N A 的核心技术。
1972 年在旧金山 H.
W.
Boyer 实验室首先发现的 EcoRI 核酸内
切限制酶具有特别重要的意义。1967 年在世界上有 5 个实验室
几乎同时发现了 DN A 连接酶。1970 年当时在 Wisconsin 大学的
H.
G.
Khorana 实验室的一个小组,发现 T4DNA 连接酶具有更
高的连接活性,有时甚至能催化完全分离的两段 D N A 分子进
行末端的连接(平末端)。到了 1972 年底,人们已经掌握了好
几种连接双链 D N A 分子的方法。
在 70 年代,将外源 DN A 分子导入大肠杆菌的转化现象
获得成功,1972 年斯坦福大学的 S.
Cohen 等人报道,劲氯化钙
处理的大肠杆菌细胞同样也能够
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